골기법

Golgi's method
은질산수법으로 얼룩진 해마의 카밀로 골기가 그린 그림
산티아고 라몬 이 카잘이 한 소뇌피질푸르킨제 세포를 그린 것으로, 골기 스텐딩 공법의 위력을 명확히 보여줌으로써 미세한 디테일을 드러낸다.
골지 기법으로 얼룩진 인간의 신구질 피라미드 뉴런.소마 위로 수직으로 뻗어 있는 아피셜 덴드라이트와 셀 본체의 밑부분에서 횡방향으로 방사되는 수많은 기저 덴드라이트를 주목하라.

골기의 방법가벼운 현미경 검사 아래 신경조직을 시각화하는 데 쓰이는 은빛 얼룩무늬 기법이다.이 방법은 이탈리아의사과학자카밀로 골기가 1873년 이 기술로 만든 첫 그림을 출판한 것에 의해 발견되었다.[1]처음에는 골기에 의해 흑색반응(la reazione nera)으로 명명되었으나, 나중에 골기 착색법이나 골기법으로 더 잘 알려지게 되었다.

골지 얼룩은 스페인신경종양학자 산티아고 라몬 이 카잘(1852~1934)이 신경계 조직에 관한 여러 가지 새로운 사실을 발견하기 위해 사용했던 것으로 뉴런 교리의 탄생을 고무시켰다.결국 라몬 이 카잘은 그가 "이중 난공"이라고 부르는 방법을 사용함으로써 기술을 향상시켰다.아직도 사용되고 있는 라몬 이 카잘의 얼룩 기술을 카잘의 얼룩이라고 한다.[citation needed]

메커니즘

신경조직의 세포들은 빽빽하게 들어차 있고 세포들이 모두 얼룩져 있으면 그들의 구조와 상호 연결에 대한 정보를 거의 얻을 수 없다.더욱이 신경세포의 과 신경세포의 덴드라이트를 포함한 얇은 필라멘트 확장체는 너무 가늘고 투명해서 정상적인 얼룩 기술로 볼 수 없다.골기의 방법은 한정된 수의 세포 전체를 무작위로 더럽힌다.이런 일이 일어나는 메커니즘은 아직 대부분 알려져 있지 않다.[2]세포소마뿐만 아니라 덴드라이트는 갈색과 검은색으로 선명하게 얼룩져 있고 전체 길이를 따라갈 수 있어 신경원자학자들이 뉴런 사이의 연결을 추적하고 척수의 많은 부분의 복잡한 네트워킹 구조를 볼 수 있게 했다.

골기의 얼룩은 알데히드 고정 신경조직에 중크롬산칼륨질산 은을 주입해 이뤄진다.따라서 얼룩진 세포는 은색 크로마이트미세결정화에 의해 채워진다.

테크닉

시냅스웹에 따르면,[3] 골기의 얼룩무늬 기법의 레시피는 다음과 같다.

  1. 포름알데히드 고정(또는 파라오름알데히드-글루타알데히드-퍼퓨전) 뇌 조직을 디크롬산칼륨의 2% 수용액에 이틀 동안 담근다.
  2. 블록을 여과지로 잠시 말리십시오.
  3. 이 블록을 질산 은 2% 수용액에 이틀 더 담근다.
  4. 단면을 약 20–100 µm 두께로 절단하십시오.
  5. 에탄올에서 빠르게 수분을 제거하여 클리어하고 마운트하십시오(예: Depex 또는 Enthalan).

이 기법은 이후 염화 금에 표본을 담근 후 옥살산에 담근 다음 티오술프산 나트륨에 의해 은을 제거함으로써 은을 금으로 대체하도록 개량되었다.이것은 작은 금 입자로 표시된 초구조적 디테일로 보다 높은 수준의 미세 구조를 보존한다.[4]

인용하다

라몬 이 카잘은 골기 방법에 대해 다음과 같이 말했다.

나는 크롬-실버 반응의 놀라운 흥청망청한 힘과 그 발견으로 인해 과학계에 어떠한 흥분도 없는 것을 보고 직접 체험한 놀라움을 표현했다.
Recuerdos de mi vida, 제2권, Historyia de mi labority centiofica.마드리드:모야, 1917 페이지 76.

참조

  1. ^ Finger, Stanley (1994). Origins of neuroscience : a history of explorations into brain function. Oxford University Press. p. 45. ISBN 9780195146943. OCLC 27151391. In 1873, Golgi published the first brief but "adequate" picture of la reazione nera (the black reaction), which showed the whole nerve cell, including its cell body, axon, and branching dendrites.
  2. ^ Nicholls, J. G. (2001). From neuron to brain. Sinauer Associates. pp. 5. ISBN 0878934391.
  3. ^ Spacek, J., Fiala, J. (2002-06-28). "Visualization of Dendritic Spines". SynapseWeb. Archived from the original on 2010-06-26. Retrieved 2010-06-17.{{cite web}}: CS1 maint : 복수이름 : 작성자 목록(링크)
  4. ^ "Home – Springer".[데드링크]

외부 링크