제한 플래그먼트
Restriction fragment제한단편은 제한효소(제한핵산가수분해효소)에 의해 DNA 가닥이 절단된 DNA 조각으로,[1] 제한이라 불리는 과정이다.각 제한 효소는 매우 특이하며, 특정 짧은 DNA 배열 또는 제한 부위를 인식하고 이 부위 내의 특정 지점에서 두 DNA 가닥을 절단합니다.대부분의 제한 부위는 회문이며(각 가닥의 5'에서 3' 방향으로 읽었을 때 양쪽 가닥에서 뉴클레오티드의 배열이 동일함), 4~8개의 뉴클레오티드 길이이다.긴 DNA 분자에서 이러한 배열의 우연한 반복 때문에 하나의 제한 효소에 의해 많은 절단들이 이루어지며, 일련의 제한 조각들을 생산합니다.특정 DNA 분자는 동일한 제한 효소에 노출될 때 항상 동일한 제한 조각 세트를 생성합니다.제한 조각은 겔 전기영동과 같은 기술을 사용하여 분석하거나 재조합 DNA [2]기술에 사용할 수 있습니다.
적용들
재조합 DNA 기술에서는 특정 유전자를 분리하여 당인산염의 등뼈를 다른 점(대칭성 유지)에서 절단하는 특정 제한핵산가수분해효소가 사용되어 이중가닥 제한단편이 외가닥 끝을 가진다.끈적끈적한 끝이라고 불리는 이 짧은 연장들은 같은 효소로 절단된 다른 DNA에 보완적인 끈적끈적한 끝과 함께 수소 결합 염기쌍을 형성할 수 있습니다.
아가로스겔 전기영동에서는 제한단편이 원래의 DNA분자의 특징적인 밴드패턴을 생성하며, 예를 들어 바이러스나 플라스미드의 비교적 작은 DNA분자를 그 제한단편 패턴으로 간단히 동정할 수 있다.만약 두 개의 다른 대립 유전자의 뉴클레오티드 차이가 특정 제한 효소의 제한 부위 내에서 일어난다면, 그 효소를 가진 특정 유전자에 대해 다른 대립 유전자를 가진 개인들로부터의 DNA 세그먼트의 소화는 다른 단편들을 만들어 낼 것이고, 각각은 겔 전기영동에서 다른 밴드 패턴을 만들어 낼 것이다.
레퍼런스
- ^ Roberts, R. J. (2005). "How restriction enzymes became the workhorses of molecular biology". Proceedings of the National Academy of Sciences. 102 (17): 5905–5908. doi:10.1073/pnas.0500923102. PMC 1087929. PMID 15840723.
- ^ Campbell, Neil A.; Jane B. Reece (2005). Biology (Seventh ed.). Benjamin Cummins. ISBN 0-8053-7171-0.