확장 폴리(A) 검정

이 글에는 여러 가지 문제가 있다. 이 문제를 개선하거나 대화 페이지에서 토의하십시오. (이러한 템플릿 메시지를 제거하는 방법 및 시기 알아보기) 이 기사의 주제는 위키피디아의 일반적인 공신력 가이드라인을 충족하지 못할 수 있다. 주제와 무관하고 사소한 언급 이상의 중요한 내용을 제공하는 신뢰할 수 있는 2차 소스를 인용함으로써 주제의 공신력을 증명할 수 있도록 도와주십시오. 공지를 표시할 수 없는 경우, 기사는 병합, 리디렉션 또는 삭제될 가능성이 높다. 출처 찾기: "Extension Poly(A) Test" – 뉴스 · 신문 · 도서 · 학자 · JSTOR (2015년 11월) (이 템플릿 메시지를 제거하는 방법과 시기 학습) 이 기사는 대체로 또는 전적으로 단일 출처에 의존한다. 관련 토론은 토크 페이지에서 찾을 수 있다. 추가 출처에 인용구를 도입하여 이 기사를 개선할 수 있도록 도와주십시오. 출처 찾기: "연장 폴리(A) 시험" – 뉴스 · 신문 · 도서 · 학자 · JSTOR (2015년 11월) 이 기사는 주요 출처에 대한 언급에 너무 많이 의존하고 있다. 이차 또는 3차 소스를 추가하여 개선하십시오. (2015년 11월) (이 템플릿 메시지를 제거하는 방법과 시기 알아보기) 이 글은 고아로, 다른 어떤 기사도 그것에 연결되지 않는다. 관련 기사에서 이 페이지에 대한 링크를 소개하고, 제안사항을 보려면 링크 찾기 도구를 사용해 보십시오(2012년 12월). (이 템플릿 메시지를 제거하는 방법 및 시기 알아보기)

확장 폴리(A) 시험(ePAT)은 mRNA 분자의 폴리(A) 꼬리 길이를 결정하는 방법을 설명한다. A가 개발하여 기술하였다. 2012년 야닉케 외.

이 방법은 세 단계로 구성된다: 첫 번째 단계에서, 폴리-아데닐화 RNA는 5' 끝에서 폴리-데옥시미딘 시퀀스를 특징으로 하는 DNA 올리고뉴클레오타이드에 혼합된다. 클레노우 중합효소는 그 후 DNA 올리고뉴클레오티드를 템플릿으로 사용하여 mRNA의 3'끝의 연장을 촉매로 한다. 이 반응은 25 °C에서 일어난다. 두 번째 단계에서 역분해효소 합성은 mRNA의 확장된 3의 끝으로 분해된 DNA 올리고뉴클레오티드를 확장한다. 내부 폴리(A) 시퀀스에 혼합된 DNA 과점자가 역전사의 프라이머 역할을 하지 않도록 하기 위해 55°C에서 두 번째 단계를 수행한다. 세 번째 및 마지막 단계는 PCR을 통해 새로 합성된 cDNA를 증폭하는 것이다. 이 PCR에는 유전자별 프라이머 1개와 범용 프라이머 1개가 필요하다. 증폭기 길이를 분석하면 두 개의 프라이머가 나란히 배치된 시퀀스(즉, 샘플 mRNA의 폴리(A) 꼬리 길이)를 추정할 수 있다.

저자들에 따르면, 폴리(A) 꼬리 길이의 측정과 다른 기록들 사이의 분포에 따르면, 이 방법은 단백질 번역 상태에 대한 더 지루한 분석 대신에 세포의 번역 상태를 결정하는 데 사용될 수 있다.^[1]

참조