초생식의
SuparnosticsuPARnostic은 혈액 [1]내 가용성 우로키나아제 플라스미노겐 활성화 수용체(suPAR)의 양을 측정하는 단순화된 이중 모노클로널 항체 샌드위치 효소 결합 면역 흡수제(ELISA) 분석법입니다.혈장 SUPAR 수치의 상승은 다양한 감염,[2] 염증 및 자가 면역 질환에서 관찰되었습니다.superPAR 농도는 면역 체계의 활성화 수준과 긍정적으로 관련이 있습니다.SUPARnostic은 환자 내에서 질병의 심각성을[3] 결정하기 위한 예후 도구로 사용될 수 있지만, 환자의 면역 반응의 심각성을 감지할 수 있지만 환자가 앓고 있을 수 있는 특정 질병을 드러내지 않기 때문에 신뢰할 수 있는 진단 도구로는 사용되지 않습니다.최근 superPAR 수치의 증가는 전신 염증 반응 증후군(SIRS)/ 패혈증, 심혈관 질환, 제2형 당뇨병, 감염성 질환,[4] HIV[5], 암 결핵,[3][6] 말라리아, 세균 및 바이러스 CNS 감염,[7] 류마티스 [8]관절염의 위험 증가와 관련이 있는 것으로 나타났습니다.일반 인구의[3] 다발성 경화증과 사망률.
SUPARnostic ELISA 수행
suPARnostic ELISA를 수행하려면 suPAR에 대한 높은 특이성을 가진 두 개의 항체가 필요합니다.알 수 없는 양의 supPAR이 포함된 환자의 혈장 검체는 투명 마이크로티터 플레이트의 마이크로웰에 고정되어 있으며 검출 항체는 supPAR과 복합체를 형성합니다.각 단계 사이에 플레이트를 세척 버퍼로 헹궈 플레이트의 웰에 특별히 결합하지 않는 단백질을 폐기합니다.최종 세척 단계 후 TMB 기판을 추가하여 샘플 내 superPAR의 양을 나타내는 가시적인 신호를 생성하여 플레이트를 개발합니다.측정된 흡광도는 표준 곡선의 값을 기준으로 시료 내 superPAR 농도(ng/mL)로 변환할 수 있습니다.그러면 이 수준은 환자가 [3]면역 체계에 대한 어려움을 경험하고 있는지 여부를 제시할 수 있습니다.
원칙
SUPARnostic ELISA는 체내의 SUPAR 및 SUPARII-III 수준을 측정하는 단순화된 이중 모노클로널 항체 샌드위치 검사입니다.SUPARnostic ELISA는 인간 [9]SUPAR에 대한 단일 클론 마우스 및 쥐 항체를 사용합니다.
폴리클론 항체를 사용하는 것에 비해 모노클로널 항체를 사용하는 것의 장점은 다음과 같습니다.높은 균질성, 비특이적 항체의 부재 및 배치 대 배치 또는 로트 대 로트의 변동성이 없습니다.따라서 매우 강력하고 신뢰할 수 있는 [3]검사가 수행됩니다.
샌드위치'는 고체상 항체, superPAR 및 과산화효소 결합 항체로 형성됩니다.환자 검체의 supPAR 농도(ng/mL 혈장)는 7개의 supPAR 표준에서 준비한 보정 곡선을 기반으로 보간을 통해 결정됩니다.재조합 SUPAR 표준은 건강한 인간 헌혈자 샘플에 대해 보정됩니다.흡광도는 650nm 기준 필터를 사용하여 450nm에서 마이크로티터 플레이트 판독기를 사용하여 측정합니다.혈액 샘플에서 superPAR 수준을 측정하는 것은 소변이나 뇌척수액에서 측정하는 것보다 더 높은 정확도와 정밀도를 제공합니다.감기와 같은 일시적인 질병으로 인해 SUPAR 수준이 변경되지 않습니다.또한 보관에도 불구하고 혈액 샘플을 [10][11]채취한 후에도 안정적으로 유지됩니다.
0.1 ~ 4.0 ng/mL 사이의 SUPARnostic 측정은 환자가 건강하고 면역 체계에 문제가 없으며 기회 감염 또는 염증의 징후나 증상이 없음을 시사합니다. 모집단의 평균 수준은 3.4 ng/mL입니다.그러나, 환자의 면역 체계는 4.0 이상에서 최대 6.0 ng/mL의 superPAR 수준에서 '음성적으로 활성화된' 것으로 간주될 수 있으며, 이는 잠재적인 감염이나 높은 수준의 염증을 나타냅니다.이 경우 환자의 건강이 악화될 가능성이 있으므로 추가 검사를 의뢰해야 합니다. 6.0 ng/mL에서 두 자리 수 수준까지의 SPARnostic 측정은 심각한 상태로 빠르게 진행되고 있음을 나타낼 수 있습니다.중환자실 환자의 평균 수준은 10.0ng/mL입니다.다양한 인종에 내재된 superPAR 수준에는 차이가 없지만, 남성과 [9][11]여성에 따라 척도가 다릅니다.
두 가지의 초PARnostic 테스트를 사용할 수 있습니다.SUPARnostic 표준 ELISA(코드 번호)A001)은 연구 및 대규모 시험을 위한 것으로, 한 배치는 더블렛의 41개 샘플로 구성됩니다.SUPARnostic Flex ELISA(코드 번호)A002)는 93개의 샘플로 구성된 임상 애플리케이션을 위해 개발되었으며 모듈식이고 유연하며 2시간 [11]내에 완전한 정량적 결과를 제공합니다.
실용적 고려사항
SUPARnostic 키트는 냉장 보관 기간이 몇 년이며 냉동된 경우 더 오래 보관할 수 있습니다.키트는 사용하기 전에 실온에서 30분 동안 보관해야 하지만 실온에서 3~4시간 [12]동안 보관할 수 있습니다.SUPARnostic Flex ELISA(코드 번호)A002)는 2시간 [13]내에 완전한 정량적 결과를 제공할 수 있습니다. suPARnostic은 연구 목적으로 최대 41개의 샘플을 더블렛으로 또는 한 [11]번에 임상적으로 사용할 93개의 샘플을 사용하여 대규모 일괄 테스트로 실행됩니다.
superPARnostic은 현재 FDA 승인을 받지 않았지만,[11] CE/IVD로 표시되어 유럽 전역에 배포됩니다.SUPAR은 일반적인 건강을 나타내기 위한 예후 검사로서 특정 [9]질병을 암시하는 진단 도구로 사용될 수 없습니다.superPAR 분자가 혈액 뇌 [2]장벽을 통해 이동할 수 없기 때문에 superPAR은 뇌종양의 검출에 사용될 수 없습니다.
레퍼런스
- ^ "Do You Know Your suPARnostic Level?". Virogates.com. 27 July 2009. Retrieved 12 November 2009.
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- ^ Schneider, U. V.; Nielsen, R. L.; Pedersen, C.; Eugen-Olsen, J. (2007). "The prognostic value of the suPARnostic® ELISA in HIV-1 infected individuals is not affected by uPAR promoter polymorphisms". BMC Infectious Diseases. 7: 134. doi:10.1186/1471-2334-7-134. PMC 2216028. PMID 18021410.
- ^ 리골린, 지안 마테오 외.다중 골수종 환자에서 더 나쁜 예후 및 골수 외 개입을 예측하는 독립 인자로서의 가용성 우로키나아제형 플라스미노겐 활성화 수용체(suPAR).영국 혈액학 저널. 120(60): 953–959. 2003년 3월 18일.
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- ^ Pliyev BK, 멘시코프 MY. 2010.류마티스 관절염에서 활성화된 호중구에 의한 가용성 우로키나아제형 플라스미노겐 활성화 수용체(suPAR)의 방출염증. 33(1):1-9.
- ^ a b c ViroGates. "What is suPAR".
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- ^ a b c d e ViroGates. "SuPARnostic Products".
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